流式核內染色試劑盒是一種常見的實驗試劑盒,主要用于對細胞核內的DNA進行染色,以便進行進一步的細胞學及遺傳學研究。本文將從作用、原理和使用方法三個方面介紹流式核內染色試劑盒。
一、作用
流式核內染色試劑盒的作用是對細胞核內的DNA進行染色,以便進行流式細胞術的研究。流式細胞術是一種基于細胞染色技術和流式細胞儀技術的細胞學分析方法,可實現對單個細胞的遺傳學、生化學、態度和形態的快速檢測和分析。流式細胞術的應用十分廣泛,包括細胞數目、細胞周期、染色體數目、DNA含量等方面的研究。
二、原理
流式核內染色試劑盒的原理是利用DNA相對于熒光染料的親和力,對細胞核內的DNA進行選擇性染色。試劑盒里含有較高濃度的熒光染料,通過與DNA結合,使得樣本細胞的核內DNA發出熒光信號,再經過流式細胞儀的光學系統,可以獲取到染色后的數據。因此,通過對流式核內染色數據進行分析,可以得出目標細胞的DNA含量、細胞周期等信息。
三、使用方法
流式核內染色試劑盒的使用方法如下:
1.制備待測細胞:將待測細胞在生長期收集,移至離心管中,離心去除培養基,將細胞沉淀后用PBS緩沖液洗滌。
2.細胞定量:將清洗干凈的細胞沉淀用PBS緩沖液重新懸浮,利用細胞計數板計算細胞數目。
3.細胞準備:將細胞用PBS緩沖液懸浮,室溫下加入5μl流式核內染色試劑盒。
4.染色:將樣品在黑暗條件下靜置10-15分鐘,免受光照。染色過程中,應避免使樣品接觸到光線。
5.測量:將染色后的樣品放到流式細胞儀中進行測量。